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基本信息
品系名称：B6.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1 Vst /Vst
常用名： Tet-uPATg必威; Tet-uPA必威
背景：C57BL/6NCrl
毛色：黑色
鉴定方法：黑色
品系建立：
Tet-uPA必威是肝脏特异表达的Alb启动子/增强子驱动的rtTA基因和TRE-uPA基因片段转入必威建立的Tet-On调控的uPA转基因必威，在Dox诱导下uPA在肝脏表达，可引起肝损伤（如图1所示）。维通达建立的Tet-uPA必威品系是由混合背景的转基因首建鼠与C57BL/6NCRL必威回交10代获得的。Tet-uPA必威的优点是必威在未诱导时呈健康状态，在Dox给药诱导时才出现肝损伤，而且可以通过Dox的剂量控制肝损伤程度。
2006年，维通达研究人员构建了TRE-uPA 转基因必威和Alb-rtTA转基因必威，然后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性必威；通过Dox诱导，在该必威中检测到了uPA表达和肝损伤[1]。维通达技术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性必威连续8代回交到C57BL/6 NCrl，2018年获得Tet-uPA B6必威。
模型特征
图1 uPA基因在肝细胞的可调控表达。
繁育信息
交配方式：纯合扩繁
日粮信息：SPF 繁殖鼠粮
平均产子数：6
繁育周期(周)：32
基因型鉴定信息
基因 | 引物 | 序列(5’---3’) | 产物大小 |
uPA | uPA-F | GTCGAGTAGGCGTGTACGGT | 400bp(positive) |
uPA-R | CCATTTCCATGATAGCAGGT | ||
rtTA | rtTA-F | GCTCCAGATGGCAAACATACGC | 640bp(positive) |
rtTA-R | TTCCTCCAATACGCAGCCCAGT |
表型
Tet-uPA B6必威，可以在任何时间用Dox诱导肝损伤。此前研究发现，必威肝脏特异性过表达尿激酶型纤溶酶原激活蛋白(urokinase-type plasminogen activator，uPA)可引起肝细胞坏死，即uPA转基因必威可以作为肝损伤模型。但是uPA转基因鼠的缺点是死亡率高，难于繁殖。北京维通达公司开发了可调控的更接近生理性条件的肝损伤模型Tet-uPA转基因必威。这种必威转入了两个基因片段，一段是Alb-rtTA，一段是TRE-uPA，构成在肝细胞内特异表达的Tet-On系统调控的uPA转基因结构。Tet-uPA必威在不诱导的情况下是完全健康状态，可以正常繁殖；当用四环素类药物Dox诱导时，uPA在肝细胞内表达，引起肝损伤。既可以用高剂量Dox诱导产生急性肝损伤甚至肝衰竭的表型，也可以用较低剂量持续诱导成为慢性肝损伤。在合适的时间窗口诱导uPA表达，并结合高脂饮食，Tet-uPA必威可以诱导成非酒精性脂肪变性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis, NASH）、肝硬化和肝癌模型。因而Tet-uPA必威是肝损伤机理研究、保肝药物和NASH药物药效评价的理想模型。
目前业界认为最好NASH和肝癌必威模型是DIAMOND模型和MUP-uPA模型，而Tet-uPA比MUP-uPA必威更具优势，因为MUP-uPA必威是在接近成体时（5、6周龄）表达uPA，窗口期有一定限制，而Tet-uPA必威可以在任意时期诱导uPA的表达。
B6.Tet-uPA必威注射Dox（100mg/kg）后血清ALT/AST
B6.Tet-uPA诱导肝损伤并HDF饲喂3个月，可以诱导类似于人的NASH模型
天狼猩红染色 ; HE染色
应用领域
1.急慢性肝损伤模型等相关研究。
2.NASH模型、肝癌模型、以及药物安全性评估等相关研究。
参考文献
1.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.
2.Preclinical Models for Studying NASH-Driven HCC: How Useful Are They?Cell Metabolism 29, January 8, 2019
