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rasH转基因必威

1.基本信息

品系名称:CB6F1-Tg (HRAS)9/Vst

常用名:rasH必威

背景:BALB/cAnNCrl*C57BL/6NCrl

毛色:黑色

鉴定方法:Standard PCR


2.品系建立

维通达rasH必威是rasH2转基因必威的替代模型之一。rasH2转基因鼠是由日本CIEA研制,通过原核注射使必威全身过表达人HRAS基因获得该必威模型广泛用于药物安评中的致瘤性评价试验。其自发肿瘤率并不高,在出生的6个月内很少出现肿瘤或癌前细胞增生,但表现出对基因毒性化合物及非基因毒性化合物的致瘤敏感性增强,在受到致癌物诱导时可在较短时间内高发肿瘤1990年代被美国FDA批准用于药物安全性评价中的致瘤性试验,用为期半年的实验代替原规定的为期两年的普通啮齿类动物致瘤性试验。


维通达构建了包含人HRAS基因的编码序列、内含子以及上下游非编码区的染色体DNA片段的转基因载体,获得目的片段DNA全长约为7.6 Kb,并在其最末一个内含子的序列中引入一个点突变(据报道该突变可增强HRAS基因表达),使其可以在HRAS基因自身调控序列的驱动下表达)。将转基因片段注射到C57BL/6N必威受精卵原核内,获得转基因阳性首建鼠,分别扩繁建系,进行表型分析,从中筛选符合致瘤性试验的第9个系予以保留。用数字定量PCR法确定,该系单位点串联转基因拷贝数4个,用染色体步移法确定转基因串联片段,整合于必威第6号染色体上。利用Western blot检测必威各器官组织转基因表达情况,结果表明HRAS在必威前胃和肺脏中具有较高的表达量。

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3.繁育信息

交配方式:阳性(杂合)配野生

日粮信息:SPF 繁殖鼠粮

平均产子数(只):6

繁育周期(周):36


4.rasH必威的致瘤敏感性

1.rasH必威在6月龄前极少自发肿瘤。在12月龄时约有10%~20%死于自发肿瘤

2.当用Urethane 50mg/kg ip.tiw诱导时,在6个月内70%以上必威发现肺部肿瘤,也有部分有肝脏肿瘤、肉瘤等。

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肉瘤及其病理切片,40X倍


3.rasH必威应用于污水的致瘤性实验。使用甲基亚硝基脲作为阳性对照,在三个月时观察到必威胃部有实体瘤产生。污水灌胃使rasH必威在胃部能够形成明显的肿瘤,也在乳腺观察到肿瘤。


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rasH转基因必威核心技术: